ಉತ್ಪನ್ನಗಳು

X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside ಗಾಗಿ BCIG ಎಂದು ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ) ಬದಲಿ ಇಂಡೋಲ್‌ಗೆ ಜೋಡಿಸಲಾದ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಸಾವಯವ ಸಂಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ.ಸಂಯುಕ್ತವನ್ನು ಜೆರೋಮ್ ಹಾರ್ವಿಟ್ಜ್ ಮತ್ತು ಸಹಯೋಗಿಗಳಿಂದ 1964 ರಲ್ಲಿ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಯಿತು. ಔಪಚಾರಿಕ ರಾಸಾಯನಿಕ ಹೆಸರನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ನಿಖರವಾದ ಆದರೆ ಕಡಿಮೆ ತೊಡಕಿನ ಪದಗುಚ್ಛಗಳಾದ ಬ್ರೋಮೋಕ್ಲೋರೋಇಂಡಾಕ್ಸಿಲ್ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸೈಡ್ ಎಂದು ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಇಂಡಾಕ್ಸಿಲ್‌ನಿಂದ ಎಕ್ಸ್ ಎಕ್ಸ್-ಗ್ಯಾಲ್ ಸಂಕೋಚನದಲ್ಲಿ ಎಕ್ಸ್‌ನ ಮೂಲವಾಗಿರಬಹುದು.X-gal ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದಲ್ಲಿ ಅದರ ಸಾಮಾನ್ಯ ಗುರಿಯಾದ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೊಸೈಡ್‌ನ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಎಂಬ ಕಿಣ್ವದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಹಿಸ್ಟೋಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಲಜಿಯಲ್ಲಿ ಈ ಕಿಣ್ವದ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಸಹ ಇದನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಕಿಣ್ವ-ಕ್ಯಾಟಲೈಸ್ಡ್ ಜಲವಿಚ್ಛೇದನದ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಇಂಡಿಗೊ ಡೈಯಂತೆಯೇ ಕರಗದ ನೀಲಿ ಸಂಯುಕ್ತಗಳನ್ನು ನೀಡುವ ಅನೇಕ ಇಂಡಾಕ್ಸಿಲ್ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಎಸ್ಟರ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಎಕ್ಸ್-ಗಾಲ್ ಒಂದಾಗಿದೆ.

ಎಕ್ಸ್-ಗ್ಯಾಲ್ ಲ್ಯಾಕ್ಟೋಸ್‌ನ ಅನಲಾಗ್ ಆಗಿದೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಡಿ-ಲ್ಯಾಕ್ಟೋಸ್‌ನಲ್ಲಿ β-ಗ್ಲೈಕೋಸಿಡಿಕ್ ಬಂಧವನ್ನು ಸೀಳುವ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಕಿಣ್ವದಿಂದ ಹೈಡ್ರೊಲೈಸ್ ಮಾಡಬಹುದು.X-gal, β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್‌ನಿಂದ ಸೀಳಿದಾಗ, ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸ್ ಮತ್ತು 5-ಬ್ರೋಮೋ- 4-ಕ್ಲೋರೋ-3-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಂಡೋಲ್ - 1. ಎರಡನೆಯದು ನಂತರ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತವಾಗಿ ಡೈಮರೈಸ್ ಆಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 5,5'-ಡೈಬ್ರೊಮೊ-4,4'-ಡೈಕ್ಲೋರೋ ಆಗಿ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. -ಇಂಡಿಗೊ - 2, ಕರಗದ ಗಾಢವಾದ ನೀಲಿ ಉತ್ಪನ್ನ.ಎಕ್ಸ್-ಗಾಲ್ ಸ್ವತಃ ಬಣ್ಣರಹಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ನೀಲಿ-ಬಣ್ಣದ ಉತ್ಪನ್ನದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಇರುವಿಕೆಯ ಪರೀಕ್ಷೆಯಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು.ಇದು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೊಸಿಡೇಸ್ ಅನ್ನು (ಲ್ಯಾಕ್‌ಝಡ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ) ವಿವಿಧ ಅನ್ವಯಗಳಲ್ಲಿ ವರದಿಗಾರನಾಗಿ ಬಳಸಲು ಸಹ ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ.

ಎರಡು-ಹೈಬ್ರಿಡ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ, ಪರಸ್ಪರ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಅನ್ನು ವರದಿಗಾರನಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು.ಈ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ, ಯೀಸ್ಟ್ ಅಥವಾ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಾಗಿ ಜೀನೋಮ್ ಲೈಬ್ರರಿಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಬಹುದು.ಪ್ರೋಟೀನುಗಳ ನಡುವೆ ಯಶಸ್ವಿ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿದರೆ, ಅದು ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಡೊಮೇನ್ ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.ಪ್ರವರ್ತಕವು ಲ್ಯಾಕ್‌ಝಡ್ ಜೀನ್‌ಗೆ ಲಿಂಕ್ ಆಗಿದ್ದರೆ, ಎಕ್ಸ್-ಗಾಲ್ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ನೀಲಿ-ವರ್ಣದ್ರವ್ಯದ ವಸಾಹತುಗಳ ರಚನೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಉತ್ಪಾದನೆಯು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ನಡುವಿನ ಯಶಸ್ವಿ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.ಈ ತಂತ್ರವು ಸುಮಾರು 106 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಗಾತ್ರದ ಲೈಬ್ರರಿಗಳನ್ನು ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಮಾಡಲು ಸೀಮಿತವಾಗಿರಬಹುದು. ಎಕ್ಸ್-ಗ್ಯಾಲ್‌ನ ಯಶಸ್ವಿ ಸೀಳುವಿಕೆಯು ಇಂಡೋಲ್‌ನ ಬಾಷ್ಪೀಕರಣದಿಂದಾಗಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾದ ದುರ್ವಾಸನೆಯನ್ನೂ ಸಹ ಸೃಷ್ಟಿಸುತ್ತದೆ.

X-gal ಸ್ವತಃ ಬಣ್ಣರಹಿತವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ನೀಲಿ-ಬಣ್ಣದ ಉತ್ಪನ್ನದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯ β- ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್ ಇರುವಿಕೆಯ ಪರೀಕ್ಷೆಯಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು.

ಸಕ್ರಿಯ ಕಿಣ್ವದ ಈ ಸುಲಭ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಯು βgalactosidase (ಲ್ಯಾಕ್‌ಝಡ್ ಜೀನ್) ಗಾಗಿ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ವಿವಿಧ ಅನ್ವಯಗಳಲ್ಲಿ ವರದಿಗಾರ ಜೀನ್ ಆಗಿ ಬಳಸಲು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ.