ಉತ್ಪನ್ನಗಳು

ಆಂಥ್ರಾನಿಲಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಮತ್ತು ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಪತ್ತೆಯೊಂದಿಗೆ ವ್ಯುತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲ್ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫರೇಸ್‌ಗಳಿಗೆ ಹೊಸ ಉನ್ನತ-ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ.

β1-4 ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಲ್ಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ (GalT-1) ಮತ್ತು α2-6 ಸಿಯಾಲಿಟ್ರಾನ್ಸ್ಫರೇಸ್ (ST-6) ಎರಡರ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಮೂಲಕ ಅಳೆಯಲು 2-ಅಮಿನೊಬೆನ್ಜೋಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ (2AA; ಆಂಥ್ರಾನಿಲಿಕ್ ಆಮ್ಲ, AA) ವಿಶಿಷ್ಟ ಲೇಬಲಿಂಗ್ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪತ್ತೆಯೊಂದಿಗೆ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (HPLC) (ಅನುಮುಲಾ KR. 2006. ಗ್ಲೈಕೊಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಾರ್ಬೋಹೈಡ್ರೇಟ್‌ಗಳ ಉನ್ನತ-ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ವ್ಯುತ್ಪನ್ನ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಅಡ್ವಾನ್ಸ್. ಅನಲ್ ಬಯೋಕೆಮ್. 350:1-23).N-Acetylglucosamine (GlcNAc) ಮತ್ತು N-acetyllactosamine ಅನ್ನು ಸ್ವೀಕಾರಕಗಳಾಗಿ ಮತ್ತು ಯುರಿಡಿನ್ ಡೈಫಾಸ್ಫೇಟ್ (UDP) -ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸ್ ಮತ್ತು ಸಿಟಿಡಿನ್ ಮೊನೊಫಾಸ್ಫೇಟ್ (CMP) -N-ಅಸೆಟೈಲ್ನ್ಯೂರಮಿನಿಕ್ ಆಮ್ಲ (NANA) ಅನ್ನು ಅನುಕ್ರಮವಾಗಿ GalT-1 ಮತ್ತು ST-6 ಗಾಗಿ ದಾನಿಗಳಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಎಂಜೈಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು AA ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ-ಹಂತದ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು TSKgel ಅಮೈಡ್ 80 ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿನ ತಲಾಧಾರಗಳಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.Gal-β1-4GlcNAc ಮತ್ತು NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc ನೊಂದಿಗೆ ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ವ್ಯುತ್ಪನ್ನಗೊಂಡ ಮಾನದಂಡಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕಿಣ್ವದ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಗರಿಷ್ಠ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ರೇಖೀಯತೆ (ಸಮಯ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವದ ಏಕಾಗ್ರತೆ), ನಿಖರತೆ (ಇಂಟ್ರಾ- ಮತ್ತು ಇಂಟರ್‌ಸ್ಸೇ) ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಿಗೆ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ.ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವದ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು ಉಪಯುಕ್ತವೆಂದು ಕಂಡುಬಂದಿದೆ.ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಸಂವೇದನಾಶೀಲವಾಗಿವೆ ಮತ್ತು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಸಕ್ಕರೆ ಆಧಾರಿತ ಮಾಪನಗಳಿಗೆ ಸಮಾನವಾಗಿ ಅಥವಾ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿದವು.ಕಾರ್ಬೋಹೈಡ್ರೇಟ್ ಸ್ವೀಕರಿಸುವವರು ಲೇಬಲಿಂಗ್‌ಗೆ ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸುವ ಅಂತ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೆ, ಇತರ ವರ್ಗಾವಣೆಗಳ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಸ್ವರೂಪವನ್ನು ಸಹ ಬಳಸಬಹುದು.ಗ್ಲೈಕೊಪ್ರೋಟೀನ್ ಸ್ವೀಕರಿಸುವವರಿಗೆ ಒಂದು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು IgG ಬಳಸಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.IgG ಗ್ಲೈಕಾನ್‌ಗಳ (ಬೈಯಾಂಟೆನರಿ G0, G1, G2, mono- ಮತ್ತು disialylated) ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ಒಂದು ಚಿಕ್ಕ HPLC ಪ್ರೊಫೈಲಿಂಗ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು GalT-1 ಮತ್ತು ST-6 ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ತ್ವರಿತ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಅನುಕೂಲವಾಯಿತು.ಇದಲ್ಲದೆ, ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್‌ಗಳಲ್ಲಿ IgG ಗ್ಲೈಕಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಲು ಈ ಪ್ರೊಫೈಲಿಂಗ್ ವಿಧಾನವು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ.