ಉತ್ಪನ್ನಗಳು

ಕೊಲಿಸಿನ್ E1 ಚಾನಲ್ ಡೊಮೇನ್‌ನ ಮೆಂಬರೇನ್ ಟೋಪೋಲಜಿಯನ್ನು ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ರೆಸೋನೆನ್ಸ್ ಎನರ್ಜಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫರ್ (FRET) ಮೂಲಕ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.FRET ದಾನಿಯಾಗಿ ತಳೀಯವಾಗಿ ಎನ್‌ಕೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ಅಮಿನೊ ಆಸಿಡ್ (ಕೂಮರಿನ್) ಮತ್ತು ಆಯ್ದ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಿದ ಸಿಸ್ಟೀನ್ ಶೇಷವನ್ನು DABMI (4-(ಡೈಮಿಥೈಲಾಮಿನೋ) ಫೆನೈಲಾಜೋಫೆನಿಲ್-4'-ಮ್ಯಾಲೈಮೈಡ್) ನೊಂದಿಗೆ FRET ಸ್ವೀಕಾರಕವಾಗಿ ಜೋಡಿಸಲಾಗಿದೆ.ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಕೂಮರಿನ್ ಶೇಷವು ಆರ್ಥೋಗೋನಲ್ tRNA/aminoacyl-tRNA ಸಿಂಥೆಟೇಸ್ ಜೋಡಿಯ ಮೂಲಕ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ, ಇದು ಕೊಲಿಸಿನ್ ಚಾನಲ್ ಡೊಮೇನ್‌ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಸೈಟ್‌ಗೆ ಆಯ್ದ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಅನುಮತಿಸಿತು.ಪ್ರತಿಯೊಂದು ರೂಪಾಂತರವು ಕೂಮರಿನ್ ಸಂಯೋಜನೆಗಾಗಿ ಸ್ಟಾಪ್ (TAG) ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ಮತ್ತು DABMI ಲಗತ್ತಿಗೆ ಸಿಸ್ಟೀನ್ (TGT) ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.ಕರಗುವ ಮತ್ತು ಪೊರೆಯ-ಬೌಂಡ್ ಸ್ಥಿತಿಗಳಿಗೆ FRET ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಹೆಲಿಕ್ಸ್ 1-6 ಒಳಗೆ ಆರು ಇಂಟರ್ಹೆಲಿಕಲ್ ದೂರಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.FRET ಡೇಟಾವು ಮೆಂಬರೇನ್ ಅಸೋಸಿಯೇಷನ್‌ನ ಮೇಲೆ ಹೆಲಿಸ್ 3-6 ನಡುವಿನ ಇಂಟರ್ಹೆಲಿಕಲ್ ಅಂತರದಲ್ಲಿ ದೊಡ್ಡ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ, ಇದು ಚಾನಲ್ ಡೊಮೇನ್‌ನ ಮೆಂಬರೇನ್-ಬೌಂಡ್ ರಚನೆಯ ಬಗ್ಗೆ ಹೊಸ ಒಳನೋಟವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಕೊಲಿಸಿನ್ ಚಾನೆಲ್‌ಗಾಗಿ ಛತ್ರಿ ಮಾದರಿಯ ಮೇಲೆ ನಿರ್ಮಿಸುವ ಮೆಂಬರೇನ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್‌ನ ಮೇಲೆ ಕೂಮರಿನ್-ಡಿಎಬಿಎಂಐ ಫ್ರೀಟ್ ಇಂಟರ್ಹೆಲಿಕಲ್ ದಕ್ಷತೆ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ.ಚಾನೆಲ್ ಡೊಮೇನ್‌ನ ಮುಚ್ಚಿದ ಸ್ಥಿತಿಗೆ ತಾತ್ಕಾಲಿಕ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪ್ರಸ್ತುತ ಮತ್ತು ಹಿಂದೆ ಪ್ರಕಟಿಸಿದ FRET ಡೇಟಾವನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.8 ಮತ್ತು 9 ಹೆಲಿಸ್‌ಗಳಿಂದ ರೂಪುಗೊಂಡ ಕೇಂದ್ರೀಯ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಮೆಂಬ್ರೇನ್ ಹೇರ್‌ಪಿನ್‌ನ ಸುತ್ತ ಹೆಲಿಕ್ಸ್ 1, 6, 7, ಮತ್ತು 10 ರ ಮೆಂಬರೇನ್ ಇಂಟರ್‌ಫೇಶಿಯಲ್ ಅಸೋಸಿಯೇಷನ್ ​​ಮತ್ತು ಹೊರಕೋಶದ ಬದಿಯಿಂದ ಪ್ರದಕ್ಷಿಣಾಕಾರವಾಗಿ 1-7 ಹೆಲಿಕ್ಸ್‌ಗಳ ವೃತ್ತಾಕಾರದ ಜೋಡಣೆಯನ್ನು ಮಾದರಿ ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.