ಉತ್ಪನ್ನಗಳು

ಟ್ರೈಸ್ ಅಸಿಟೇಟ್ ಉಪ್ಪನ್ನು TAE (Tris-acetate-EDTA) ಬಫರ್ ತಯಾರಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಆಗಾಗ್ಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಬಫರ್ ಮತ್ತು ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಟ್ರಿಸ್ ಅಸಿಟೇಟ್-ಇಡಿಟಿಎ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಡಿನಾಟರಿಂಗ್ ಅಲ್ಲದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಸಹ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಇತರ ಬಫರ್‌ಗಳಿಗಿಂತ TAE ನಲ್ಲಿ ವೇಗವಾಗಿ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವಿಸ್ತೃತ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ದಣಿದಿರಬಹುದು.ವಿಸ್ತೃತ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬಫರ್ ಪರಿಚಲನೆ ಅಥವಾ ಬಫರ್ ಬದಲಿ ಕಡಿಮೆ ಬಫರಿಂಗ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ನಿವಾರಿಸುತ್ತದೆ.ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ DNA ಚಲನಶೀಲತೆಯನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ವಿವಿಧ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು.TBE ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿನ ಬೋರೇಟ್ (Tris-Borate-EDTA ಬಫರ್, 10X ಪೌಡರ್ ಪ್ಯಾಕ್, sc-296651) ಅನೇಕ ಕಿಣ್ವಗಳಿಗೆ ಪ್ರಬಲ ಪ್ರತಿಬಂಧಕವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, DNA ಮಾದರಿಗಾಗಿ ಕಿಣ್ವಕ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳನ್ನು ನೋಡುವಾಗ TAE ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.ಫೈರ್‌ಫ್ಲೈ ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಎಟಿಪಿ ಅಸ್ಸೇಸ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಟ್ರಿಸ್ ಅಸಿಟೇಟ್ ಉಪ್ಪು ಕೂಡ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಬಫರ್ ಆಗಿದೆ.

ಉಪಯೋಗಗಳು: TAE ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಬಫರ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಬಫರ್ ಆಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಸ್ಥಳೀಯ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಸಹ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಇತರ ಬಫರ್‌ಗಳಿಗಿಂತ TAE ನಲ್ಲಿ ವೇಗವಾಗಿ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬಫರ್ ಅಯಾನುಗಳ ಸವಕಳಿಯಿಂದಾಗಿ ಈಜಲು ವಿಫಲವಾಗುತ್ತದೆ.ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬಫರ್ ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಅಥವಾ ಬಫರ್ ವಿನಿಮಯವು ಕಡಿಮೆ ಬಫರ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸರಿದೂಗಿಸುತ್ತದೆ.2 40 mM ಟ್ರಿಸ್ ಅಸಿಟೇಟ್ ಮತ್ತು 1 mM EDTA, pH 8.3 ಹೊಂದಿರುವ 1 mMTAE ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ TAE ಬಫರ್ ಅನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.1 mMTAE ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಬಫರ್‌ನಂತೆ ಬಳಸಬಹುದು.ಗರಿಷ್ಠ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್‌ಗಾಗಿ, ಅನ್ವಯಿಕ ವೋಲ್ಟೇಜ್ 5V/cm (ಯೂನಿಟ್ ವಿದ್ಯುದ್ವಾರಗಳ ನಡುವಿನ ಅಂತರ) ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರಬೇಕೆಂದು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್: ಕೆಮಿಕಲ್‌ಬುಕ್ ಜೆಲ್‌ನಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗಾಗಿ ಟಿಎಇ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಬಫರ್ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಬಫರ್ ಆಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಡಿನಾಟ್ಯೂರಿಂಗ್ ಅಲ್ಲದ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ಗೆ ಸಹ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಇತರ ಬಫರ್‌ಗಳಿಗಿಂತ TAE ನಲ್ಲಿ ವೇಗವಾಗಿ ಚಲಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬಫರ್ ಅಯಾನುಗಳ ಸವಕಳಿಯಿಂದಾಗಿ ಈಜಲು ವಿಫಲವಾಗುತ್ತದೆ.ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬಫರ್ ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಅಥವಾ ಬಫರ್ ವಿನಿಮಯವು ಕಡಿಮೆ ಬಫರ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸರಿದೂಗಿಸುತ್ತದೆ.40 mM ಟ್ರಿಸ್ ಅಸಿಟೇಟ್ ಮತ್ತು 1 mM EDTA, pH 8.3 ಹೊಂದಿರುವ 1 mMTAE ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ TAE ಬಫರ್ ಅನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ.1 mMTAE ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಬಫರ್‌ನಂತೆ ಬಳಸಬಹುದು.ಗರಿಷ್ಠ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್‌ಗಾಗಿ, ಅನ್ವಯಿಕ ವೋಲ್ಟೇಜ್ 5V/cm (ಯೂನಿಟ್ ವಿದ್ಯುದ್ವಾರಗಳ ನಡುವಿನ ಅಂತರ) ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರಬೇಕೆಂದು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಉಪಯೋಗಗಳು: ಫೈರ್‌ಫ್ಲೈ ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ATP ಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಲ್ಲಿ, ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಅತ್ಯಂತ ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾದ ಬಫರ್ ಆಗಿದೆ;ಗ್ಲುಟಮೇಟ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪತ್ತೆ.

ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಅಲ್ಲದ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ [3H]l-ಗ್ಲುಟಾಮಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸಬಹುದಾದ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆ.

[3H]ಮೈಕ್ರೊಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಗ್ಲಾಸ್‌ಗೆ ಎಲ್-ಗ್ಲುಟಾಮಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಬಂಧಿಸುವುದನ್ನು ನಾಲ್ಕು ಬಫರ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ತನಿಖೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ಈ ವಸ್ತುಗಳಿಗೆ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯು ಅತ್ಯಲ್ಪವಾಗಿತ್ತು, ಆದರೆ ಟ್ರಿಸ್-ಎಚ್‌ಸಿಎಲ್ ಮತ್ತು ಟ್ರಿಸ್-ಸಿಟ್ರೇಟ್ ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಅಥವಾ ಹೀರುವಿಕೆಯಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಗಿದೆ.ಈ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಹೆಚ್ಚು ಕಡಿಮೆ ಅಥವಾ HEPES-KOH, ಅಥವಾ Tris-ಅಸಿಟೇಟ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿದಾಗ.[3H]ಮೈಕ್ರೊಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಿಗೆ ಎಲ್-ಗ್ಲುಟಮೇಟ್ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಎಲ್-ಆದರೆ ಗ್ಲುಟಮೇಟ್ ಮತ್ತು ಆಸ್ಪರ್ಟೇಟ್‌ನ ಡಿ-ಐಸೋಮರ್‌ಗಳಲ್ಲ.DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic ಆಮ್ಲ ಕೂಡ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸಲಿಲ್ಲ.ಕಡಿಮೆ ಮತ್ತು ಮಧ್ಯಮ ಪ್ರತಿಬಂಧಕವನ್ನು ತೋರಿಸಿದ ಇತರ ಸಂಯುಕ್ತಗಳೆಂದರೆ: ಎನ್-ಮೀಥೈಲ್-ಡಿ-ಆಸ್ಪರ್ಟೇಟ್, ಕ್ವಿಸ್ಕ್ವಾಲೇಟ್, ಎಲ್-ಗ್ಲುಟಾಮಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಡೈಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್, ಎನ್-ಮೀಥೈಲ್-ಎಲ್-ಆಸ್ಪರ್ಟೇಟ್, ಕೈನೇಟ್, ಮತ್ತು 2-ಅಮಿನೋ-4-ಫಾಸ್ಫೋನೊಬ್ಯುಟೈರೇಟ್.ಡಿನೇಚರ್ಡ್ ಇಲಿ ಮೆದುಳಿನ ಪೊರೆಗಳಿಂದ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸಲಾಗಿದೆ.ಟ್ರಿಸ್-ಅಸಿಟೇಟ್ ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಮಾಡಿದಾಗ ಪದೇ ಪದೇ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿದ-ಕರಗಿಸಿದ ಪೊರೆಯ ತಯಾರಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಪ್ರೋಟೀನ್-ಅವಲಂಬಿತ [3H]ಗ್ಲುಟಮೇಟ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಯಿತು.ಗ್ಲುಟಮೇಟ್ ಬಿನ್ ಡಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಟ್ರೈಸ್-ಅಸಿಟೇಟ್ ಅಥವಾ HEPES -KOH ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬೇಕೆಂದು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.Tris-HCl ಅಥವಾ Tris-citrate ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿದರೆ, ಮೈಕ್ರೋಫ್ಯೂಜ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳು ಅಥವಾ ಗ್ಲಾಸ್ ಫೈಬರ್ ಫಿಲ್ಟರ್‌ಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸುವುದನ್ನು ಸರಿಪಡಿಸಲು ಸೂಕ್ತವಾದ ನಿಯಂತ್ರಣ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಮಾಡಬೇಕು.