ಉತ್ಪನ್ನಗಳು

ಇಂಟರ್ವರ್ಟೆಬ್ರಲ್ ಡಿಸ್ಕ್ ಡಿಜೆನರೇಶನ್ ಎಟಿಯಾಲಜಿ ಸರಿಯಾಗಿ ಅರ್ಥವಾಗದಿದ್ದರೂ, ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟುವ ಒಂದು ವಿಧಾನವೆಂದರೆ ಅಪೊಪ್ಟೋಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವುದು.ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಪಲ್ಪೋಸಸ್ (NP) ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಕಾರ್ಬಾಕ್ಸಿಮಿಥೈಲೇಟೆಡ್ ಚಿಟೋಸಾನ್ (CMCS) ನ ವಿರೋಧಿ-ಅಪೊಪ್ಟೋಟಿಕ್ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಡಿಸ್ಕ್ ಜೀವಕೋಶದ ಬದುಕುಳಿಯುವಿಕೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಗುರಿಯೊಂದಿಗೆ ತನಿಖೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ಇಲಿ NP ಕೋಶಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಿ ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು NP ಕೋಶ ಅಪೊಪ್ಟೋಸಿಸ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸಲು ಹೈಡ್ರೋಜನ್ ಪೆರಾಕ್ಸೈಡ್ (H2O2) ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು.ಸೆಲ್ ಎಣಿಕೆಯ ಕಿಟ್-8 ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯೊಂದಿಗೆ ಸೆಲ್ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಗಿದೆ.ಅಪೊಪ್ಟೋಟಿಕ್ ಕೋಶಗಳ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಅನೆಕ್ಸಿನ್ ವಿ-ಫ್ಲೋರೆಸಿನ್ ಐಸೊಥಿಯೋಸೈನೇಟ್ (ಎಫ್‌ಐಟಿಸಿ) ಮತ್ತು ಪ್ರೊಪಿಡಿಯಮ್ ಅಯೋಡೈಡ್ (ಪಿಐ) ಡಬಲ್ ಸ್ಟೈನಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಿಂದ ಸಮೀಕ್ಷೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಹೋಚ್ಸ್ಟ್ 33342 ಸ್ಟೈನಿಂಗ್‌ನಿಂದ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನವನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಯಿತು.NP ಜೀವಕೋಶಗಳ ಮೈಟೊಕಾಂಡ್ರಿಯದ ಪೊರೆಯ ವಿಭವವನ್ನು ರೋಡಮೈನ್ 123 ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲಾಯಿತು.ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ (RT)-ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚೈನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ (qPCR) ಅನ್ನು ಇಂಡ್ಯೂಸಿಬಲ್ ನೈಟ್ರಿಕ್ ಆಕ್ಸೈಡ್ ಸಿಂಥೇಸ್ (iNOS), ಕ್ಯಾಸ್ಪೇಸ್-3, B- ಸೆಲ್ ಲಿಂಫೋಮಾ (Bcl )-2, ಟೈಪ್ II ಕಾಲಜನ್ ಮತ್ತು ಅಗ್ರೀಕನ್‌ನ mRNA ಮಟ್ಟವನ್ನು ಅಳೆಯಲು ನಡೆಸಲಾಯಿತು.iNOS ಮತ್ತು Bcl‑2 ನ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು.ಅನೆಕ್ಸಿನ್ V-FITC/PI ಮತ್ತು Hoechst 33342 ಸ್ಟೆನಿಂಗ್ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು CMCS ಅಪೊಪ್ಟೋಸಿಸ್‌ನಿಂದ NP ಕೋಶಗಳನ್ನು ಡೋಸ್-ಅವಲಂಬಿತ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ತಡೆಯಲು ಸಮರ್ಥವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸಿದೆ.ರೋಡಮೈನ್ 123 ಬಣ್ಣವು CMCS H2O2-ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ NP ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಮೈಟೊಕಾಂಡ್ರಿಯದ ಪೊರೆಯ ವಿಭವದ ದುರ್ಬಲತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸ್ಪಷ್ಟಪಡಿಸಿದೆ.RT-qPCR ಮತ್ತು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಿಂದ CMCS-ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ NP ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆಯಾದ ಕ್ಯಾಸ್ಪೇಸ್-3 ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿದ Bcl-2 ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲಾಗಿದೆ.CMCS ಸಹ H2O2-ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ NP ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಟೈಪ್ II ಕಾಲಜನ್ ಮತ್ತು ಅಗ್ರೆಕನ್‌ನ ಪ್ರಸರಣ ಮತ್ತು ಸ್ರವಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಿತು.ಡಿಸ್ಕ್ ಡಿಜೆನರೇಶನ್ ಅನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವಲ್ಲಿ ಈ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ವಿಧಾನದ ಸಂಭಾವ್ಯ ಪ್ರಯೋಜನಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುವ, ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಅಪೊಪ್ಟೋಟಿಕ್ ಜೀವಕೋಶದ ಮರಣವನ್ನು ತಡೆಗಟ್ಟುವಲ್ಲಿ CMCS ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ.