ಉತ್ಪನ್ನಗಳು

ಯುಕಾರ್ಯೋಟಿಕ್ ಕೋಶಗಳು ನಾಲ್ಕು ಡಿಆಕ್ಸಿರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಸೈಡ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ಗಳ (dNTPs) ನಿಮಿಷದ ಪ್ರಮಾಣದ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಸಮತೋಲನವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ, ಇದು ಕೆಲವೇ ನಿಮಿಷಗಳ DNA ನಕಲು ಮಾಡಲು ಸಾಕಾಗುತ್ತದೆ.ಏಕ dNTP ಯ ಕೊರತೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಎರಡೂ ಹೆಚ್ಚಿದ ರೂಪಾಂತರ ದರಗಳು, ದೋಷಯುಕ್ತ DNA ದುರಸ್ತಿ ಅಥವಾ ಮೈಟೊಕಾಂಡ್ರಿಯದ DNA ಸವಕಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು.ಡಿಎನ್‌ಟಿಪಿಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಎಂಜೈಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಅಸ್ಸೇ ಮೂಲಕ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್‌ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನಿಂದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಿಂಥೆಟಿಕ್ ಆಲಿಗೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್‌ಗಳಾಗಿ ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಡಿಎಟಿಪಿ (ಅಥವಾ ಡಿಎಟಿಪಿಗಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಡಿಟಿಟಿಪಿ) ಸಂಯೋಜನೆಯು ಅಜ್ಞಾತ ಡಿಎನ್‌ಟಿಪಿಯ ಸಾಂದ್ರತೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತದೆ.ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಕ್ಲೆನೊ ಡಿಎನ್‌ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅಜ್ಞಾತ ಡಿಎನ್‌ಟಿಪಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾದ ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ ಅನ್ನು ಬದಲಿಸಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ, ಇದು ಕೆಲವು ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್‌ಟಿಪಿಗಳ ದೊಡ್ಡ ಅಂದಾಜುಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸುವ ಪ್ರತಿ dNTP ಗಾಗಿ ನಾವು ಈಗ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತೇವೆ.dTTP ಮತ್ತು dATP ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಿಗೆ ಕ್ಲೆನೋ ಕಿಣ್ವದ ಮತ್ತು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ dATP (ಅಥವಾ dTTP) ಸಾಂದ್ರತೆಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಇದು ಸಾಕಾಗುತ್ತದೆ;dCTP ಮತ್ತು dGTP ಗಾಗಿ ನಾವು t he Klenow ಕಿಣ್ವವನ್ನು Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅಥವಾ ಥರ್ಮೋ ಸೀಕ್ವೆನೇಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸಬೇಕಾಗಿತ್ತು.ಕೆಲವು ಹಿಂದಿನ ವರದಿಗಳಲ್ಲಿ ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್ ಸಂಯೋಜನೆಯು dGTP ಮತ್ತು dCTP ಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ಸೂಚಿಸುತ್ತೇವೆ.