ಉತ್ಪನ್ನಗಳು

ಮಾನವ ಕರುಳಿನ ಸಹಜೀವನದಲ್ಲಿ ಆಲ್ಫಾ-ಮನ್ನೊಸಿಡೇಸ್‌ಗಳ Ca2+-ಅವಲಂಬಿತ ಕುಟುಂಬಕ್ಕೆ ಯಾಂತ್ರಿಕ ಒಳನೋಟಗಳು.

Bacteroides thetaiotaomicron ನಿಂದ ಉದಾಹರಿಸಿದ ಕೊಲೊನಿಕ್ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ, ಆಹಾರದ ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಹೋಸ್ಟ್ ಗ್ಲೈಕಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಪೋಷಕಾಂಶಗಳಾಗಿ ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಗ್ಲೈಕೋಸೈಡ್ ಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್‌ಗಳ (GHs) ದೊಡ್ಡ ಕುಟುಂಬಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳುವ ಮೂಲಕ ಮಾನವನ ಆರೋಗ್ಯವನ್ನು ಕಾಪಾಡುವಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರವನ್ನು ವಹಿಸುತ್ತದೆ.ಅಂತಹ GH ಕುಟುಂಬದ ವಿಸ್ತರಣೆಯು B. thetaiotaomicron ಜೀನೋಮ್‌ನಿಂದ ಎನ್‌ಕೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ 23 ಕುಟುಂಬದ GH92 ಗ್ಲೈಕೋಸಿಡೇಸ್‌ಗಳಿಂದ ನಿರೂಪಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ.ಹೋಸ್ಟ್ ಎನ್-ಗ್ಲೈಕಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಒಂದೇ ಸ್ಥಳಾಂತರ ಯಾಂತ್ರಿಕತೆಯ ಮೂಲಕ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಆಲ್ಫಾ-ಮನ್ನೊಸಿಡೇಸ್‌ಗಳು ಎಂದು ಇಲ್ಲಿ ನಾವು ತೋರಿಸುತ್ತೇವೆ.ಎರಡು GH92 ಮನ್ನೊಸಿಡೇಸ್‌ಗಳ ಮೂರು ಆಯಾಮದ ರಚನೆಯು ಎರಡು-ಡೊಮೈನ್ ಪ್ರೊಟೀನ್‌ಗಳ ಕುಟುಂಬವನ್ನು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ವೇಗವರ್ಧಕ ಕೇಂದ್ರವು ಡೊಮೇನ್ ಇಂಟರ್ಫೇಸ್‌ನಲ್ಲಿದೆ, ಇದು Ca (2+) ನಲ್ಲಿ ಜಲವಿಚ್ಛೇದನೆಗೆ ಆಮ್ಲ (ಗ್ಲುಟಮೇಟ್) ಮತ್ತು ಬೇಸ್ (ಆಸ್ಪರ್ಟೇಟ್) ಸಹಾಯವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಅವಲಂಬಿತ ವಿಧಾನ.ಪ್ರತಿಬಂಧಕಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿರುವ GH92 ಗಳ ಮೂರು ಆಯಾಮದ ರಚನೆಗಳು ವೇಗವರ್ಧನೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ, ಕಾರ್ಯವಿಧಾನ ಮತ್ತು ಅನುಸರಣಾ ಪ್ರಯಾಣದ ಒಳನೋಟವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ.Ca(2+) ಮ್ಯಾನೋಸೈಡ್ ಅನ್ನು ಅದರ ನೆಲ-ಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ (4)C(1) ಚೇರ್ ಕನ್ಫರ್ಮೇಶನ್‌ನಿಂದ ಪರಿವರ್ತನೆಯ ಸ್ಥಿತಿಗೆ ವಿರೂಪಗೊಳಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುವಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ವೇಗವರ್ಧಕ ಪಾತ್ರವನ್ನು ವಹಿಸುತ್ತದೆ. (ಗ್ರಂಥಸೂಚಿ: Nat.ಕೆಮ್.ಬಯೋಲ್.6, 125-32, (2010)

ಕಾಂಕಾನಾವಲಿನ್ ಎ-ಸೆಫರೋಸ್ ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಓವಲ್ಬ್ಯುಮಿನ್ ಗ್ಲೈಕೋಸ್ಪ್ಯಾರಜಿನ್‌ಗಳ ಮುಂಭಾಗದ ಅಫಿನಿಟಿ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ.ಲೆಕ್ಟಿನ್‌ನ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಅಧ್ಯಯನ.

ಓವಲ್ಬ್ಯುಮಿನ್‌ನಿಂದ ಪಡೆದ 10 ಗ್ಲೈಕೋಸ್ಪ್ಯಾರಜಿನ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸೆಫರೋಸ್ 4B-ನಿಶ್ಚಲವಾಗಿರುವ ಕಾನ್ಕಾನಾವಲಿನ್ A (ConA) ಯ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಮುಂಭಾಗದ ಅಫಿನಿಟಿ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಿಂದ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ತನಿಖೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ಈ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ, ಕಾರ್ಬೋಹೈಡ್ರೇಟ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕಾನ್ಎ-ಸೆಫರೋಸ್ ಕಾಲಮ್‌ಗೆ ನಿರಂತರವಾಗಿ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎಲುಷನ್ ಮುಂಭಾಗದ ಮಂದಗತಿಯನ್ನು ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ನಿಯತಾಂಕವಾಗಿ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.ConA ಜೊತೆಗಿನ ಪ್ರತಿ ಸ್ಯಾಕರೈಡ್‌ಗೆ ವಿಘಟನೆಯ ಸ್ಥಿರಾಂಕವನ್ನು (Kd) ನಿರ್ಧರಿಸಬಹುದು.p-nitrophenyl-alpha,D-mannoside ನ ಬಂಧದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ConA ಯ ಬಂಧಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಸೆಫರೋಸ್ 4B ನಲ್ಲಿ ನಿಶ್ಚಲತೆಯ ನಂತರ ಮೂಲಭೂತವಾಗಿ ಬದಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ.ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ರಿಡಕ್ಟಿವ್ ಮೆತಿಲೀಕರಣ ವಿಧಾನದ ಮೂಲಕ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಓವಲ್ಬ್ಯೂಮಿನ್ ಗ್ಲೈಕೋಸ್ಪ್ಯಾರಜಿನ್ಗಳನ್ನು ಟ್ರಿಟಿಯಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ಪಡೆದ Kd ಮೌಲ್ಯಗಳ ಹೋಲಿಕೆಯು ಗ್ಲೈಕೋಸಿಲ್ ಸರಪಳಿಯ ಸ್ವಲ್ಪ ರಚನಾತ್ಮಕ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳೊಂದಿಗೆ ConA ಯ ಬಂಧವು ಗಣನೀಯವಾಗಿ ಬದಲಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ.ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ConA ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಗ್ಲೈಕೋಸಿಲ್ ಚೈನ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ, ಮ್ಯಾನ್ ಆಲ್ಫಾ 1-6 (ಮ್ಯಾನ್ ಆಲ್ಫಾ 1-3) ಮ್ಯಾನ್, ಇದರಲ್ಲಿ C-6-ಲಿಂಕ್ಡ್ ಮನ್ನೋಸ್‌ನ C-3 ಸ್ಥಾನದಲ್ಲಿ ಕನಿಷ್ಠ ಒಂದು ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲ್ ಗುಂಪು ಮುಕ್ತವಾಗಿರಬೇಕು.